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改良Page髓鞘染色液
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產(chǎn)品特點(diǎn):
改良Page髓鞘染色液公司正在出售的產(chǎn)品:改良愛德華瓊脂基礎(chǔ) Edwards Medium,Modified 250g100mg C Cytochrome C -20℃保存50T 腸道病毒EV71 PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存20L 長效期SDS-PAGE電泳液(干粉)(適合2-30 kD蛋白) Stable SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存100mL Tr
  改良Page髓鞘染色液的詳細(xì)資料:

中文名稱:改良Page髓鞘染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:4×50ml

產(chǎn)品貨號:BJ-01X6861

用途:

又稱砂羅鉻花青髓鞘染色法

注意事項(xiàng):

染色結(jié)果為:髓鞘呈藍(lán)色,紅細(xì)胞呈深藍(lán)色,神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)、肌纖維和膠原纖維呈桃紅色,細(xì)胞核呈紅色。

儲存條件:室溫,避光,12個月

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

Fowl Adenovirus(FAdV-B)禽腺病毒B型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Acetyl-Histone H3(K18)  乙?;M蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Davainea proglottina節(jié)片代凡絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CAMKK2  鈣調(diào)蛋白激激β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Influenza Virus A甲型流感()病毒H5N2亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周FBXO4  FBXO4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Human T-cell Lymphoma Virus(HTLV)人類嗜T淋巴  病毒通用RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-PKR (Thr451)  磷酸化蛋白激R抗體 規(guī)格: 0.1ml

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒D亞群RT-LAMP試劑盒,停 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周LIF  白抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rous′ Sarcoma Virus(RSV)羅斯肉瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-rat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Caulis bambusae in taenia竹茹染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周TCRG  T細(xì)胞受體γ抗體 規(guī)格: 0.2ml

Pasteurella multocida多殺巴斯德LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周α-Adaptin  銜接蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1ml

Enterobacter cloacae陰溝腸桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周ECM1  細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Flos lonicerae金銀花LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周GTPBP4/CRFG  GTP結(jié)合蛋白4抗體(慢性功能衰竭蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

改良Page髓鞘染色液ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒*直銷

牛非酯化脂肪酸(NEFA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠降鈣素(CT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

猴子免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒*直銷

小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

山羊還原型甘肽(GSH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠多巴胺(DA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人腺病毒36抗體(AdV36-Ab)免疫試劑盒*直銷

大象孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒*直銷

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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聯(lián)系人:王經(jīng)理
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