細(xì)胞周期檢測(cè)實(shí)驗(yàn)是一種通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)來(lái)分析細(xì)胞在細(xì)胞周期各階段分布的實(shí)驗(yàn)方法。這個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)于理解細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和疾病狀態(tài)至關(guān)重要。

細(xì)胞周期檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 收集細(xì)胞：A: 收集細(xì)胞5~20×105于離心管中，若細(xì)胞比較小(如淋巴細(xì)胞)400 g離心，若細(xì)胞比較大(如腫瘤細(xì)胞)300 g離心，5~10 min，棄去培養(yǎng)液;

2. 洗滌：加入1 ml冷PBS(提前放4℃預(yù)冷)洗滌1次，離心棄去上清;

3. 固定前處理：利用管底殘留的液體，輕彈管底，將沉淀重懸成細(xì)胞懸液，避免細(xì)胞成團(tuán);

4. 細(xì)胞固定：加入約1 ml -20℃預(yù)冷的無(wú)水乙醇中，輕輕吹打混勻，-20℃固定1 h或過(guò)夜;

5. 洗滌：加入1 ml冷PBS(提前放4℃預(yù)冷)洗滌1次，300 g離心10min，棄去上清;

6. RNA酶消化：300 g 離心 5 min，吸盡上清后，加入 100 μL 的 RNase A 并充分懸浮細(xì)胞，37°C 水浴 30 min。

7. PI染色：加入400μL的PI溶液并充分混勻，4℃避光孵育30 min;

8. 上機(jī)檢測(cè)：用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長(zhǎng)488nm波長(zhǎng)處檢測(cè)紅色熒光，低速獲取細(xì)胞，采用分析軟件進(jìn)行DNA含量分析。